1. 細胞準備：選擇處于對數生長期、匯合度80%-90%的細胞，確保細胞狀態良好（>90%活力）。凍存前24h換液一次。

2. 收集細胞：貼壁細胞用胰蛋·白酶消化，完·全培養基終止；懸浮細胞直接收集。1000rpm離心5min，棄上清。

3. 重懸凍存：加入適量TBD598凍存液，輕柔吹打混勻，使細胞密度達到1×10?~1×10?個/mL。

4. 分裝標記：按1~1.5mL/管分裝于無菌凍存管中，擰緊管蓋，標注細胞名稱、代數、日期。

5. 程序降溫：4℃放置30-40min → -20℃放置30-60min → -80℃過夜 → 轉移至液氮長期保存。或使用程序降溫盒（-1℃/min）直接置于-80℃后轉液氮。

優勢：血清成分提供豐富的營養因子、抗凍蛋白及代謝緩沖，對常規細胞系（尤其是永生化細胞系）的保護效果成熟穩定，復蘇存活率高；價格遠低于進口無血清凍存液。

適用場景：常規科研細胞保種、細胞庫構建、教學實驗、藥物篩選模型細胞保存等。

注意：若實驗體系要求無血清（如細胞治療、蛋白表達、臨床級應用），建議選用天津灝洋同系列TBD698（不含血清不含DMSO）或TBD798無血清凍存液。